2016年12月21日 星期三

食品微生物-測定乳酸菌

食品微生物實驗-乳酸菌測定

△國家標準 CNS3058 醱酵乳之分類與成份標準
 圖一:


圖一 CNS3058 國家標準中各類醱酵乳之分類方式 (取自 CNS3058 預覽資料第三頁)


圖二:



















圖二 CNS3058 國家標準中各類醱酵乳之成分與生菌數之標準 (取自CNS3058預覽資料第四
頁)

附註:CNS是經濟部的品質標準,不是衛生福利部的衛生標準。

△衛福部公告之 食品微生物之檢驗方法-生菌數之檢驗之生菌數計
算方式
2.1. 生菌之計算
2.1.1. 經培養後,選取25~250個菌落之兩個平板來計數,其生菌數之表示方式為CFU/g或
CFU/mL。
2.1.2. 若各稀釋倍數中僅有一種稀釋倍數平板之菌落數為25~250個,則應以該稀釋倍數之
兩個平板之菌落數平均值乘其稀釋倍數,即得其生菌數(附表:樣品編號1);但若有
兩種稀釋倍數之平板之菌落數在25~250個之間時,則應依下列公式計算之,但生菌
數結果表示時應將該數字第三位數字四捨六入(當第三位數字為五時,遇第二位數字
為奇數時進位,偶數時捨去),使其有效數為兩位。(附表:樣品編號2)。
生菌數(CFU/g或CFU/mL)=[(Aa+Ab)/2*A+(Ba+Bb)/2*B]/2

Aa、Ab:A稀釋倍數各平板內之菌落數。
Ba、Bb:B稀釋倍數各平板內之菌落數。
A、B:稀釋倍數。

2.1.3. 各稀釋倍數之菌落數均小於25個時,則以最低稀釋倍數之兩個平板菌落數平均值乘
其稀釋倍數。並註明其為估計值(附表:樣品編號3)。

2.1.4. 平板中菌落數大於250個時,則先計數平板中菌落分佈其代表性之一部份,再計算生
菌數,而以估計值表示(附表:樣品編號4)。

2.1.5. 擴散菌落,擴散菌落可分為3種形式:
(1)鏈狀菌落,不能明顯分離,似乎由一堆細菌分裂生長而成。
(2)細菌生長介於培養基及培養皿底部間之一層水氣中。
(3)細菌生長於培養基邊緣或表面上之一層水氣上。

2.1.5.1. 平板內產生擴散菌落時應以下述之方法計數。(附表:樣品編號5)擴散菌落所覆
蓋面積(包括被擴散菌落造成之抑制生長範圍)超過整個平板面積之1/2時或者
被擴散菌落造成之抑制生長範圍超過1/4時,應不予計數,而記錄為’’擴散
菌落’’。

2.1.5.2. 擴散菌落形成鏈狀時,若僅一條則應視為一個菌落,若有兩條以上存在時,應
視其鏈源處之不同,分別計數之。若為彼此分開而形成大菌落時,亦應予以計
數。

2.1.6. 各稀釋倍數均無菌落生長者,則生菌數應小於1乘以最低稀釋倍數並註明估計值(附
表:樣品編號6)。

2.1.7. 若二重複平板之菌落數,其中一片在25~250個之間,另一片大於250個時,兩者均
應計數(附表:樣品編號7)。

2.1.8. 若二稀釋倍數之菌落數,各有一片在25~250個之間,另一片大於250個或小於25
個時,四片皆計數,並依2.5.2.節公式計算之(附表:樣品編號8)。

2.1.9. 當二稀釋倍數之菌落數,其中1稀釋倍數之2重複平板之菌落數均在25~250之間,
另1稀釋倍數之2重複平板之菌落數,一片在25~250之間,另一片大於250個或小
於25個時,四片皆計數,並依公式計算之(附表:樣品編號9及10)。

2.1.10. 確證被污染者或依其他理由認為不適當者,應不得計算之。
附註:這部份應該參考衛福部公布之《食品微生物之檢驗方法-乳酸菌之檢驗》(2012-
06-07),該法規有詳細步驟,但計算菌數仍要參考《食品微生物之檢驗方法-生菌數之檢
驗》(2012-11-19) 之說明。




實驗目的:

基礎技能練習
1.擦拭實驗桌

2.練習使用安全吸球取液體

3.練習序列稀釋之操作


實驗過程:


1.擦拭實驗桌:

技巧:
1.  先噴酒精(70~75%),不用急著擦掉,因為殺菌需要時間。
2.  切記:單方向,不是來回抹。(防止交叉汙染)


2.練習使用安全吸球取液體:




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